ACE色譜柱是一種具有多模式分離能力的高效液相色譜（HPLC）工具，其核心優(yōu)勢(shì)在于通過特殊固定相設(shè)計(jì)和靈活的流動(dòng)相調(diào)控，實(shí)現(xiàn)多種分離模式的切換。

　　一、ACE色譜柱的多模式分離技術(shù)原理：

　　1. 固定相設(shè)計(jì)

　　混合功能基團(tuán)：

　　ACE色譜柱的固定相通常含有多種官能團(tuán)，支持多種相互作用模式。

　　納米結(jié)構(gòu)調(diào)控：

　　通過表面修飾技術(shù)（如鍵合硅膠、聚合物涂覆）形成均勻的納米孔結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)傳質(zhì)效率，適應(yīng)不同分子大小的分離需求。

　　2. 流動(dòng)相調(diào)控

　　溶劑極性調(diào)整：

　　通過改變流動(dòng)相中水相與有機(jī)相的比例，調(diào)節(jié)分離機(jī)制。例如：

　　高有機(jī)相比例：以疏水作用為主（反相色譜模式）；

　　低有機(jī)相比例：激活極性相互作用（正相或氫鍵色譜模式）。

　　pH與離子強(qiáng)度：

　　調(diào)整流動(dòng)相的pH值或添加離子對(duì)試劑，可切換離子交換（IEC）或手性分離模式。

　　3. 溫度與梯度控制

　　溫度敏感性：

　　某些ACE柱對(duì)溫度變化敏感，可通過升溫或降溫改變固定相與溶質(zhì)的相互作用強(qiáng)度（如氫鍵色譜）。

　　梯度洗脫：

　　結(jié)合梯度洗脫技術(shù)，在同一分析中實(shí)現(xiàn)多種分離模式的協(xié)同作用（如反相+離子交換聯(lián)用）。

　　二、ACE色譜柱支持的分離模式：

　　1. 反相色譜（RPC）

　　原理：基于疏水相互作用，非極性物質(zhì)先流出。

　　應(yīng)用場(chǎng)景：分離肽類、藥物小分子、天然產(chǎn)物等中等極性物質(zhì)。

　　典型條件：乙腈/水或甲醇/水梯度洗脫，pH 2~7。

　　2. 正相色譜（NPC）

　　原理：基于極性吸附作用，極性物質(zhì)先流出。

　　激活條件：使用低極性有機(jī)溶劑（如正己烷）與極性調(diào)節(jié)劑。

　　應(yīng)用場(chǎng)景：分離脂溶性成分（如脂肪酸、甾體）、手性化合物。

　　3. 氫鍵色譜（HILIC）

　　原理：依賴固定相表面的極性基團(tuán)（如酰胺、氰基）與溶質(zhì)形成氫鍵。

　　典型條件：高比例水相與極性調(diào)節(jié)劑。

　　應(yīng)用場(chǎng)景：極性代謝物、核苷酸、氨基酸分析。

　　4. 離子交換色譜（IEC）

　　原理：通過固定相上的離子交換位點(diǎn)（如磺酸基、季銨基）分離帶電離子。

　　激活條件：調(diào)整流動(dòng)相pH至溶質(zhì)電離狀態(tài)，或添加離子對(duì)試劑。

　　應(yīng)用場(chǎng)景：蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物大分子的電荷異構(gòu)體分離。

　　5. 手性色譜（Chiral HPLC）

　　原理：固定相含手性識(shí)別位點(diǎn)（如纖維素衍生物、環(huán)糊精），通過立體選擇性吸附分離對(duì)映體。

　　典型條件：正相或反相體系，搭配極性有機(jī)溶劑（如乙醇）或離子液體。

　　應(yīng)用場(chǎng)景：藥物分子（如布洛芬、沙利度胺）的對(duì)映體純度檢測(cè)。